RNAclean Kit

A-1 Cellelyse eller homogenisering ikke tilstrækkelig

---- Reducer prøveforbrug, øg mængden af ​​lyseringsbuffer, øg homogenisering og lystid.

A-2 Prøvebeløbet er for stort

---- Reducer mængden af ​​anvendt prøve, eller øg mængden af ​​lyseringsbuffer.

A-1 Utilstrækkelig cellelyse eller homogenisering

---- Reducer prøveforbrug, øg mængden af ​​lyseringsbuffer, øg homogenisering og lystid.

A-2 Prøvebeløbet er for stort

---- Se den maksimale behandlingskapacitet.

A-3 RNA elueres ikke fuldstændigt fra søjlen

---- Efter tilsætning af RNase-frit vand, lad det stå i et par minutter før centrifugering.

A-4 Ethanol i eluenten

---- Efter skylning centrifugeres igen, og vaskbufferen fjernes så meget som muligt.

A-5 Cellekulturmedium fjernes ikke fuldstændigt

---- Når du indsamler celler, skal du sørge for at fjerne dyrkningsmediet så meget som muligt.

A-6 Cellerne lagret i RNAstore centrifugeres ikke effektivt

---- RNAstore tæthed er større end det gennemsnitlige cellekulturmedium; så centrifugalkraften bør øges. Det foreslås at centrifugeres ved 3000x g.

A-7 Lavt RNA-indhold og overflod i prøven

---- Brug en positiv prøve til at afgøre, om det lave udbytte skyldes prøven.

A-1 Materialet er ikke friskt

---- Friskt væv skal opbevares i flydende nitrogen straks eller straks lægges i RNAstore-reagenset for at sikre ekstraktionseffekten.

A-2 Prøvebeløbet er for stort

---- Reducer prøvebeløb.

A-3 RNase contamination

---- Selvom bufferen i kittet ikke indeholder RNase, er det let at forurene RNase under ekstraktionsprocessen og skal håndteres forsigtigt.

A-4 Elektroforese forurening

---- Udskift elektroforesebufferen, og sørg for, at forbrugsstoffer og Loading Buffer er fri for RNase-forurening.

A-5 For meget belastning for elektroforese

---- Reducer mængden af ​​prøvebelastning, belastningen af ​​hver brønd må ikke overstige 2 μg.

A-1 Prøvebeløbet er for stort

---- Reducer prøvebeløb.

A-2 Nogle prøver har et højt DNA-indhold og kan behandles med DNase.

---- Udfør RNase-fri DNase-behandling til den opnåede RNA-opløsning, og RNA'et kan direkte bruges til efterfølgende forsøg efter behandling eller kan renses yderligere med RNA-oprensningssæt.

Til glasvarer, bagt ved 150 ° C i 4 timer. For plastbeholdere, nedsænket i 0,5 M NaOH i 10 minutter, derefter skyllet grundigt med RNase-frit vand og derefter steriliseret for helt at fjerne RNase. De reagenser eller opløsninger, der anvendes i forsøget, især vand, skal være fri for RNase. Brug RNase-frit vand til alle reagenspræparater (tilsæt vand til en ren glasflaske, tilsæt DEPC til en slutkoncentration på 0,1% (V/V), ryst natten over og autoklav).