Serum/plasma -cirkulerende DNA -kit

A-1 Lav koncentration af celler eller virus i startprøven-Berig koncentrationen af ​​celler eller vira.

A-2 Utilstrækkelig lysering af prøverne-Prøverne er ikke blevet blandet grundigt med lyseringsbufferen. Det foreslås at blande grundigt ved puls-vortexing 1-2 gange. - Utilstrækkelig cellelyse forårsaget af aktivitetsnedgang i proteinase K. - Utilstrækkelig cellelyse eller nedbrydning af proteiner på grund af utilstrækkelig varm badetid. Det foreslås at skære vævet i små stykker og forlænge badetiden for at fjerne alle resterne i lysatet.

A-3 Utilstrækkelig DNA-adsorption. -Ingen ethanol eller lav procentdel i stedet for 100% ethanol blev tilsat, før lysatet blev overført til spinsøjlen.

A-4 Elueringsbufferens pH-værdi er for lav. —Juster pH til mellem 8,0-8,3.

Resterende ethanol i eluenten.

—Der er resterende vaskebuffer PW i eluenten. Ethanolen kan fjernes ved centrifugering af spinsøjlen i 3-5 minutter og derefter anbringelse ved stuetemperatur eller 50 ℃ inkubator i 1-2 minutter.

A-1 Prøven er ikke frisk. - Ekstraher et positivt prøve -DNA som kontrol for at afgøre, om DNA'et i prøven er nedbrudt.

A-2 Forkert forbehandling. —Forårsaget af overdreven flydende nitrogenslibning, fugtgenvinding eller for stor mængde af prøven.

Forbehandlingerne bør variere for forskellige prøver. For planteprøver skal du grundigt male i flydende nitrogen. For dyreprøver homogeneres eller slibes grundigt i flydende nitrogen. For prøver med cellevægge, der er svære at bryde, såsom G+ bakterier og gær, foreslås det at bruge lysozym, lyticase eller mekaniske metoder til at bryde cellevæggene.

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit vedtager en søjlebaseret metode, der kræver chloroform til ekstraktionen. Det er især velegnet til forskellige planteprøver samt plant tørt pulver. Hi-DNAsecure Plant Kit er også søjlebaseret, men uden behov for phenol/chloroform-ekstraktion, hvilket gør det sikkert og giftfrit. Det er velegnet til planter med højt polysaccharider og polyphenolindhold. 4992709/4992710 DNAquick Plant System anvender en væskebaseret metode. Phenol/chloroform -ekstraktion er heller ikke nødvendig. Oprensningsproceduren er enkel og hurtig uden nogen grænse for prøvens startmængder, så brugerne kan justere mængden fleksibelt i henhold til de eksperimentelle krav. Stor størrelse af gDNA -fragmenter kan opnås med højt udbytte.

Det genomiske DNA blev ekstraheret fra forskellige mængder af humane fuldblodsprøver ved hjælp af TIANamp Blood DNA Kit. Resultaterne er som følger. Resultaterne er angivet som reference, de faktiske ekstraktionsresultater afhænger af prøveforholdene.

Blodprop -DNA -ekstraktionen kan udføres ved hjælp af reagenserne i disse to kits ved blot at ændre protokollen til den specifikke instruktion for blodprop -DNA -ekstraktion. Den bløde kopi af blodprop -DNA -ekstraktionsprotokollen kan udstedes efter anmodning.

Suspender den friske prøve med 1 ml PBS, normal saltvand eller TE -buffer. Prøven fuldstændigt homogeniseres med en homogenisator og opsamler bundfaldet til bunden af ​​et rør ved centrifugering. Bortskaf supernatanten, og resuspender bundfaldet med 200 pi buffer GA. Følgende DNA -oprensning kan udføres i henhold til instruktionen.

Til oprensning af gDNA i plasma-, serum- og kropsvæskeprøver anbefales TIANamp Micro DNA Kit. Til oprensning af virus gDNA fra serum/plasmaprøver anbefales TIANamp Virus DNA/RNA Kit. Til oprensning af bakterielt gDNA fra serum- og plasmaprøver anbefales TIANamp Bacteria DNA Kit (lysozym bør inkluderes for positive bakterier). Til spytprøver anbefales Hi-Swab DNA Kit og TIANamp Bacteria DNA Kit.

DNAsecure Plant Kit eller DNAquick Plant System anbefales til ekstraktion af svampegener. Til gærgenomextraktion anbefales TIANamp Yeast DNA Kit (lyticase bør være selvforberedt).